IPTG CAS:367-93-1 Τιμή κατασκευαστή
Το ισοπροπυλ β-D-1-θειογαλακτοπυρανοσίδιο (IPTG) είναι ένα συνθετικό ανάλογο της λακτόζης που χρησιμοποιείται συνήθως στην έρευνα της μοριακής βιολογίας και σε εφαρμογές βιοτεχνολογίας.Το IPTG χρησιμοποιείται κυρίως για την πρόκληση της έκφρασης γονιδίων σε βακτηριακά συστήματα, όπου χρησιμεύει ως μοριακός έναυσμα για την έναρξη της μεταγραφής των γονιδίων-στόχων.
Όταν προστίθεται στο μέσο ανάπτυξης, το IPTG προσλαμβάνεται από τα βακτήρια και μπορεί να συνδεθεί με την πρωτεΐνη καταστολέα lac, εμποδίζοντάς την να μπλοκάρει τη δραστηριότητα του οπερονίου lac.Το οπερόνιο lac είναι ένα σύμπλεγμα γονιδίων που εμπλέκονται στο μεταβολισμό της λακτόζης και όταν αφαιρεθεί η πρωτεΐνη καταστολέα, τα γονίδια εκφράζονται.
Το IPTG χρησιμοποιείται συχνά σε συνδυασμό με τον μεταλλαγμένο προαγωγέα lacUV5, ο οποίος είναι μια συστατικά ενεργή εκδοχή του προαγωγέα lac.Συνδυάζοντας την επαγωγή IPTG με αυτόν τον μεταλλαγμένο προαγωγέα, οι ερευνητές μπορούν να επιτύχουν υψηλά επίπεδα γονιδιακής έκφρασης.Αυτό επιτρέπει την παραγωγή μεγάλων ποσοτήτων πρωτεΐνης για καθαρισμό ή άλλες κατάντη εφαρμογές.
Εκτός από τη γονιδιακή έκφραση, το IPTG χρησιμοποιείται επίσης συχνά σε προσδιορισμούς διαλογής μπλε/λευκού.Σε αυτή την τεχνική, το γονίδιο lacZ τυπικά συντήκεται με ένα γονίδιο ενδιαφέροντος και τα βακτήρια που εκφράζουν επιτυχώς αυτό το γονίδιο σύντηξης θα παράγουν ένα ενεργό ένζυμο β-γαλακτοσιδάσης.Όταν το IPTG προστίθεται μαζί με ένα χρωμογόνο υπόστρωμα όπως το X-gal, τα βακτήρια που εκφράζουν το γονίδιο σύντηξης γίνονται μπλε λόγω της δραστηριότητας της β-γαλακτοσιδάσης.Αυτό επιτρέπει την ταυτοποίηση και την επιλογή ανασυνδυασμένων στελεχών που έχουν ενσωματώσει επιτυχώς το γονίδιο ενδιαφέροντος.
Επαγωγή γονιδιακής έκφρασης: Το IPTG χρησιμοποιείται συνήθως για να επάγει την έκφραση των γονιδίων-στόχων σε βακτηριακά συστήματα.Μιμείται τον φυσικό επαγωγέα λακτόζη και συνδέεται με την πρωτεΐνη καταστολέα lac, εμποδίζοντάς την να μπλοκάρει το οπερόνιο lac.Αυτό επιτρέπει τη μεταγραφή και έκφραση των επιθυμητών γονιδίων.
Έκφραση και καθαρισμός πρωτεΐνης: Η επαγωγή IPTG χρησιμοποιείται συχνά για την παραγωγή μεγάλων ποσοτήτων ανασυνδυασμένων πρωτεϊνών για διάφορους σκοπούς, όπως βιοχημικές μελέτες, θεραπευτική παραγωγή ή δομική ανάλυση.Χρησιμοποιώντας κατάλληλους φορείς έκφρασης και επαγωγή IPTG, οι ερευνητές μπορούν να επιτύχουν υψηλά επίπεδα παραγωγής πρωτεΐνης στόχου σε βακτηριακούς ξενιστές.
Διαλογή μπλε/λευκού: Το IPTG χρησιμοποιείται συχνά σε συνδυασμό με το γονίδιο lacZ και ένα χρωμογόνο υπόστρωμα, όπως το X-gal, για προσδιορισμούς διαλογής μπλε/λευκού.Το γονίδιο lacZ τυπικά συντήκεται με το γονίδιο ενδιαφέροντος και τα βακτήρια που εκφράζουν επιτυχώς αυτό το γονίδιο σύντηξης θα παράγουν ένα ενεργό ένζυμο β-γαλακτοσιδάσης.Όταν προστίθενται το IPTG και το χρωμογόνο υπόστρωμα, τα ανασυνδυασμένα στελέχη που εκφράζουν το γονίδιο σύντηξης γίνονται μπλε, επιτρέποντας την εύκολη αναγνώριση και επιλογή.
Μελέτη γονιδιακής ρύθμισης: Η επαγωγή IPTG χρησιμοποιείται συνήθως στην έρευνα για τη μελέτη της ρύθμισης των γονιδίων και των οπερονίων, ιδιαίτερα του οπερονίου lac.Με το χειρισμό των συγκεντρώσεων του IPTG και την παρακολούθηση της έκφρασης των συστατικών του οπερονίου lac, οι ερευνητές μπορούν να διερευνήσουν τους μηχανισμούς ρύθμισης των γονιδίων και τον ρόλο διαφόρων παραγόντων ή μεταλλάξεων.
Συστήματα γονιδιακής έκφρασης: Το IPTG είναι ένα κρίσιμο συστατικό σε πολλά συστήματα γονιδιακής έκφρασης, όπως τα συστήματα που βασίζονται σε προαγωγείς Τ7.Σε αυτά τα συστήματα, ο προαγωγέας lac χρησιμοποιείται συχνά για να οδηγήσει την έκφραση της Τ7 RNA πολυμεράσης, η οποία, με τη σειρά της, μεταγράφει τα γονίδια στόχους υπό τον έλεγχο των αλληλουχιών προαγωγέα Τ7.Το IPTG χρησιμοποιείται για να επάγει την έκφραση της Τ7 RNA πολυμεράσης, που οδηγεί στην ενεργοποίηση της έκφρασης του γονιδίου στόχου.
| Σύνθεση | C9H18O5S |
| Χημική δοκιμή | 99% |
| Εμφάνιση | άσπρη σκόνη |
| CAS Αρ. | 367-93-1 |
| Συσκευασία | Μικρό και χύμα |
| Διάρκεια ζωής | 2 χρόνια |
| Αποθήκευση | Αποθηκεύστε σε δροσερό και ξηρό χώρο |
| Πιστοποίηση | ISO. |
