Φαινυλογαλακτοσίδη CAS:2818-58-8

Επίδραση στη δραστηριότητα του ενζύμου: Η φαινυλογαλακτοσίδη χρησιμοποιείται συνήθως για τη μέτρηση της δραστηριότητας του ενζύμου β-γαλακτοσιδάση.Όταν ο φαινυλογαλακτοσίδης υδρολύεται από τη β-γαλακτοσιδάση, απελευθερώνει π-νιτροφαινόλη.Η συσσώρευση της π-νιτροφαινόλης μπορεί να μετρηθεί ποσοτικά, παρέχοντας πληροφορίες για τη δραστηριότητα της β-γαλακτοσιδάσης.Αυτό το αποτέλεσμα αξιοποιείται σε εφαρμογές όπως ενζυμικές δοκιμασίες και συστήματα διαλογής.

Ανάλυση γονιδιακής έκφρασης: Η φαινυλογαλακτοσίδη χρησιμοποιείται συχνά ως υπόστρωμα σε πειράματα μοριακής βιολογίας για τη μελέτη της γονιδιακής έκφρασης.Το γονίδιο lacZ, το οποίο κωδικοποιεί τη β-γαλακτοσιδάση, συνήθως συντήκεται με ρυθμιστικές αλληλουχίες άλλων γονιδίων ενδιαφέροντος.Η έκφραση του γονιδίου lacZ και η υδρόλυση της φαινυλογαλακτοσίδης από τη β-γαλακτοσιδάση μπορεί να υποδεικνύει το πρότυπο έκφρασης και το επίπεδο του γονιδίου στόχου που μελετάται.

Συστήματα διαλογής: Η φαινυλογαλακτοσίδη είναι ένα σημαντικό συστατικό των συστημάτων διαλογής που χρησιμοποιούν τη δραστηριότητα της β-γαλακτοσιδάσης.Ένα ευρέως γνωστό παράδειγμα είναι η μέθοδος διαλογής μπλε-λευκού, η οποία χρησιμοποιείται για την αναγνώριση ανασυνδυασμένων ή μετασχηματισμένων κυττάρων σε πειράματα μοριακής βιολογίας.Οι αποικίες που έχουν προσλάβει επιτυχώς το ανασυνδυασμένο DNA ή έχουν υποστεί γενετικό ανασυνδυασμό θα εκφράζουν β-γαλακτοσιδάση, οδηγώντας στην υδρόλυση της φαινυλογαλακτοσίδης και στο σχηματισμό ενός μπλε χρώματος.

Καθαρισμός πρωτεΐνης: Σε ορισμένες περιπτώσεις, ο φαινυλογαλακτοσίδης μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως πρόσδεμα για χρωματογραφία συγγένειας για τον καθαρισμό πρωτεϊνών που συνδέονται ειδικά με ή ενεργοποιούνται από τη β-γαλακτοσιδάση.Η πρωτεΐνη που ενδιαφέρει μπορεί να έχει μια ετικέτα συγγένειας ή μια ετικέτα σύντηξης που περιέχει μια περιοχή δέσμευσης β-γαλακτοσιδάσης.Περνώντας το μείγμα πρωτεΐνης μέσω στήλης με ακινητοποιημένο φαινυλογαλακτοσίδη, η επιθυμητή πρωτεΐνη μπορεί να συγκρατηθεί επιλεκτικά και στη συνέχεια να εκλουστεί.